壓力蒸汽滅菌的生物監(jiān)測(cè)法是利用嗜熱脂肪桿菌芽孢的活菌對(duì)滅菌效能進(jìn)行監(jiān)測(cè), 它能及時(shí)有效反映物品的滅菌質(zhì)量, 保證了臨床使用的安全性。現(xiàn)將我院生物監(jiān)測(cè)的干濕式恒溫箱培養(yǎng)介紹如下。

1 材料與方法

1. 1 材料

生物指示劑嗜熱脂肪桿菌( ATCC7953 )芽孢, 北京四環(huán)衛(wèi)生藥械廠生產(chǎn), 含菌量5 x105 ~  5x106 c fu /片(自含式),配備專用的56℃培養(yǎng)箱干濕式各1臺(tái), 分別由上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司生產(chǎn)的電熱恒溫水浴箱和上海博迅實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)的隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱。

1. 2 方法

將每組2支生物指示劑管置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心部位。試驗(yàn)包分別放置于LDZM-60KCS智能型帶干燥功能壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠生產(chǎn)）內(nèi)上層前部, 中層中部, 下層后部(排氣口上方),滅菌器裝載量達(dá)90%, 采用的運(yùn)行程序, 內(nèi)室蒸汽壓為0.21~0.22MPa內(nèi)室溫度為132℃~134℃。滅菌8min,干燥10min。連續(xù)監(jiān)測(cè)34周次,每周1次。滅菌結(jié)束即刻將生物指示劑管取出, 蓋面朝上垂直握于手中用鑷子夾住指示管下端尖部, 將管內(nèi)瓿夾碎,讓培養(yǎng)液流出浸沒(méi)菌片,充分振搖, 然后分別放置于干濕式的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h, 同時(shí)放置1支未經(jīng)滅菌程序處理的生物指示劑管作陽(yáng)性對(duì)照, 管內(nèi)培養(yǎng)液由紫色變?yōu)辄S色, 即表示有菌生長(zhǎng), 判斷滅菌不合格, 如仍為紫色即表示無(wú)菌生長(zhǎng)。同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照生長(zhǎng)正常判斷滅菌合格。

2 結(jié)果

連續(xù)生物監(jiān)測(cè)34次中, 干燥室培養(yǎng)滅菌合格34次, 合格率為100%, 而濕式培養(yǎng)箱培養(yǎng)滅菌合格22次, 合格率75%。

3 討論

必須選擇同批號(hào)的生物指示劑作為對(duì)照, 且對(duì)照管必須為陽(yáng)性, 如果對(duì)照管出現(xiàn)陰性, 其原因可能是菌片上微生物本已死亡或培養(yǎng)基已失效或培養(yǎng)溫度不符合要求。干燥室培養(yǎng)箱恒溫效果好, 生物指示劑蓋面上的三個(gè)小孔不宜受到污染而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果, 而濕式水浴恒溫培養(yǎng)箱在56度時(shí)仍有部分的熱水汽通過(guò)指示劑蓋面上的三個(gè)小孔進(jìn)入而引起培養(yǎng)基污染而出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果, 從而影響生物監(jiān)測(cè)的準(zhǔn)確判斷。任何生物指示劑呈陽(yáng)性結(jié)果時(shí),均應(yīng)認(rèn)為是滅菌失敗。出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)應(yīng)采取相應(yīng)的措施,要將所有物品收回重新處理;檢查滅菌過(guò)程的各個(gè)方面(滅菌器, 裝載過(guò)程和包裝技術(shù)等),找出滅菌失敗的可能原因;用幾個(gè)生物指示劑重新測(cè)試滅菌器的工作狀態(tài); 在生物指示劑結(jié)果都是陰性前不要使用該滅菌器;另外還要考慮生物指示劑本身是否符合質(zhì)量要求及培養(yǎng)壞境等情況。根據(jù)醫(yī)院消毒供應(yīng)中心管理規(guī)范每周必須對(duì)滅菌器做次生物監(jiān)測(cè), 是控制消毒滅菌質(zhì)量的有效可靠的方法,有利于及時(shí)發(fā)現(xiàn)滅菌過(guò)程中的新問(wèn)題, 并及時(shí)解決, 保證了醫(yī)院滅菌物品供應(yīng)的高質(zhì)量。